促進干細胞生長并抑制分化新培養(yǎng)基


時間:2010-04-23





  以色列耶路撒冷哈達薩大學的研究人員近日開發(fā)出一種新的干細胞培養(yǎng)基,能讓干細胞在更長時間內不分化。這項研究是由哈達薩人類胚胎干細胞研究中心的主管Benjamin Reubinoff領導的,發(fā)表在近期的Nature Biotechnology上。作者們相信這項技術將對臨床應用所需的大量hESC特別有用。

  為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細胞(也就是一層小鼠胚胎成纖維細胞)上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng)。但是在這些基質上培養(yǎng)干細胞是相當昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長時間內保持未分化狀態(tài),盡管所有必需的生長因子都存在。

  Reubinoff的研究團隊正在研究hESC簇分化成神經細胞,他們一直在使用Invitrogen的Neurobasal培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基能夠在無滋養(yǎng)層的條件下長時間維持神經細胞的生長和正常表型。在研究過程中,研究人員注意到并非所有細胞都分化了。他們懷疑是培養(yǎng)基的選擇導致了這種現(xiàn)象,于是他們開始集中精力研究培養(yǎng)基如何促進干細胞生長并抑制分化。

  為了驗證他們的理論,研究小組定制了培養(yǎng)基。他們在Neurobasal培養(yǎng)基中加入了血清替代物,還加入了干細胞生長所需的蛋白,包括細胞外基質組分、神經營養(yǎng)因子、成纖維細胞生長因子2和活化素A。研究人員在常規(guī)的無血清培養(yǎng)基和定制培養(yǎng)基中培養(yǎng)了hESC。三個星期之后,定制培養(yǎng)基中存在更多的未分化hESC細胞。

  使用這種新的培養(yǎng)基,研究小組檢驗了三種不同的hESC系。他們利用熒光激活細胞分選(FACS)在7周和20周后分析了培養(yǎng)物,發(fā)現(xiàn)90%的細胞仍維持多能性。這項突破為在計算機化的自動系統(tǒng)中大規(guī)模擴增胚胎干細胞創(chuàng)造了可能性。此外,通過改變培養(yǎng)條件,還可能進一步指導干細胞長成特定的細胞類型,用于研究或病人的移植。

  然而,研究小組也承認,他們的方法并不完美。在細胞傳代過程中,他們丟失的細胞數是滋養(yǎng)層培養(yǎng)方法的近3倍。他們還將繼續(xù)完善這種技術,以確保培養(yǎng)產量盡可能地高。



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