食品添加劑苯甲酸檢測方法研究進(jìn)展

苯甲酸作為食品添加劑，其添加量多少將直接影響到人體健康。該文綜述高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、氣相色譜法、紫外分光光度法及薄層層析法等檢測方法基本原理及其近幾年在苯甲酸檢測技術(shù)方面研究進(jìn)展，最后展望這些檢測方法在苯甲酸檢測方面發(fā)展前景。

苯甲酸外觀為白色結(jié)晶體，有安息香或苯甲氣味，其蒸氣具有很強(qiáng)刺激性，主要用作食品添加劑，具有抑制食品中微生物繁殖或殺滅、防止食品腐敗變質(zhì)、保持食品鮮度作用。但若過量添加，不僅能破壞維生素B1，還能使鈣形成不溶性物質(zhì)，影響人體對鈣的吸收，同時(shí)對胃腸道有刺激作用；過量食用可誘發(fā)癌癥〔1〕，長期使用可誘發(fā)哮喘、蕁麻疹及血管性水腫等變態(tài)反應(yīng)，對人體健康造成不利影響。

近年來，食品安全已成為全社會共同關(guān)注熱點(diǎn)。苯甲酸作為食品添加劑，我國GB2760–1996《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定其使用限量應(yīng)＜0.1g/kg，故有關(guān)苯甲酸含量檢測研究也備受關(guān)注。本文就苯甲酸檢測方法研究進(jìn)展作一綜述，為我國開展食品添加劑苯甲酸檢測提供參考。

1·高效液相色譜法

高效液相色譜是從20世紀(jì)60年代后期開始發(fā)展起來的，具有填料顆粒小、且均勻，小顆粒具有高柱效特點(diǎn)，該法是目前應(yīng)用最多一種色譜分析方法。與經(jīng)典液相色譜相比，其優(yōu)點(diǎn)是分辨率高、靈敏度高、樣品量少、易回收和色譜柱可重復(fù)使用等〔2〕。

中國國家質(zhì)量監(jiān)督局發(fā)布乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸測定方法為高效液相色譜法，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定奶制品中苯甲酸檢測制樣和高效液相色譜測定方法，適于乳與乳制品中苯甲酸和山梨酸含量測定。祝偉霞〔1〕、Pingqi〔3〕分別以醋酸鋅和亞鐵氰化鉀溶液作為沉淀劑，對奶粉、酸奶和其它發(fā)酵乳制品進(jìn)行處理，然后采用反相色譜法測定其中苯甲酸含量。證明該法具有前處理簡單、方便、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。

液相色譜法除可檢測乳制品中苯甲酸含量，還能測定其在其它食品中含量。Tfouni等〔4〕采用高效液相色譜法測定巴西食品中苯甲酸含量。分別將飲料、果汁、黃油及奶酪等食品進(jìn)行粉碎處理，然后與蒸餾水混合，再用氫氧化鈉溶液將pH值調(diào)為堿性，最后離心處理，取上層清液進(jìn)行反相色譜法測定，其檢測精密度和準(zhǔn)確度均能滿足分析要求。Liu等〔5〕采用液相色譜儀測定面粉和油炸食品中苯甲酸含量，樣品經(jīng)乙醇超聲破碎后提取苯甲酸，然后用C18柱進(jìn)行梯度洗脫。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測得苯甲酸線性檢出范圍為0.50~15.06mg/L，最低檢出限為0.22mg。

2·毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳（簡稱CE），是上世紀(jì)80年代初發(fā)展起來一種新型高效分離技術(shù)〔6〕。以毛細(xì)管為分離通道，以高壓支流電場為驅(qū)動力，通常使用內(nèi)徑為25，000~100，000nm彈性涂層熔融石英管。該毛細(xì)管特點(diǎn)是容積小、側(cè)截比大，可用自由溶液或凝膠等為支持介質(zhì)，在溶液介質(zhì)下能產(chǎn)生平面狀電流場〔7〕。該法具有高效、快速、樣品量少、測定成本低等優(yōu)點(diǎn)。

Han等〔8〕以對羥基苯甲酸為內(nèi)標(biāo)，采用毛細(xì)管電泳系統(tǒng)對食品中苯甲酸含量進(jìn)行檢測，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，檢出限范圍為10~20ng/mL。胡美珍等〔9〕對樣品進(jìn)行超聲、除二氧化碳處理，然后用乙醚進(jìn)行抽提、凈化，再將提取物用高效毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行檢測。通過對實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化選擇，最終測得苯甲酸在濃度5mg/L~50mg/L時(shí)線性關(guān)系良好，樣品回收率95%以上：實(shí)驗(yàn)過程快速、回收率高，在食品分析領(lǐng)域具有良好應(yīng)用前景。李利軍等〔10〕采用ACS2000高效毛細(xì)管電泳儀對苯甲酸進(jìn)行測定，通過對緩沖體系、檢測波長、分離電壓等條件優(yōu)化，測得苯甲酸緩沖體系為含有15mmol/L十六烷基三甲基溴化銨體積分?jǐn)?shù)1%乙酸，檢測波長285nm，分離電壓20KV，線性范圍為5~40μg/mL。該法具有良好重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度，可用于苯甲酸生產(chǎn)過程質(zhì)量控制和檢測。

3·氣相色譜法

氣相色譜法出現(xiàn)于1952年，已成為分離科學(xué)中較為成熟、使用最普遍、運(yùn)行最容易一種分離分析方法〔11〕。該法以氣體作為流動相，除應(yīng)用于分析氣體試樣，還可分析易揮發(fā)或可轉(zhuǎn)化為易揮發(fā)液體和固體；不僅可分析有機(jī)物，也可分析部分無機(jī)物。隨著檢測技術(shù)發(fā)展，還出現(xiàn)與氣相色譜儀聯(lián)用氣相色譜―質(zhì)譜檢測技術(shù)。

劉敏紅等通過樣品酸化，用乙醚提取苯甲酸，然后用帶氫火焰離子檢測器氣相色譜儀進(jìn)行分離測定。通過對柱溫箱、載氣流量等條件進(jìn)行優(yōu)化，并通過精密度試驗(yàn)、準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)、靈敏度實(shí)驗(yàn)，最終證明該檢測方法可行性，為苯甲酸檢測研究提供另一種思路。Farahani等〔12〕運(yùn)用氣相色譜―質(zhì)譜儀（GC/MS）分析飲料和生活用水中苯甲酸含量。首先將樣品進(jìn)行前處理，然后采用GC/MS對樣品進(jìn)行分析，最終測得苯甲酸線性檢出范圍為0.5~500μg/mL，相關(guān)性≥0.99，重復(fù)性良好（RSID＜10.3%，n=8），回收率為90%~113%，從而證明該法準(zhǔn)確、有效。

4·紫外分光光度法

該法檢測原理是苯甲酸為共軛型有機(jī)化合物，在近紫外光區(qū)具有較強(qiáng)吸收〔13〕，經(jīng)實(shí)測證實(shí)，苯甲酸在230nm處有最大吸收峰。苯甲酸在10°時(shí)溶解度為0.21g/100mL水，20°時(shí)為0.28g/100mL水〔14〕。因此可將標(biāo)樣和樣品用水溶解后采用紫外分光光度計(jì)進(jìn)行含量檢測。

曾啟華〔15〕運(yùn)用7520型紫外分光光度計(jì)測定酸性食品中苯甲酸含量，經(jīng)試驗(yàn)證實(shí)，該法操作簡單、易于掌握，在操作和結(jié)果準(zhǔn)確性上具有一定優(yōu)勢，與氣相色譜法比較，其結(jié)果極為接近，不會影響到對結(jié)果判斷。杜向東〔16〕用751G紫外分光光度計(jì)檢測面粉中添加苯甲酸，其檢測原理是將苯甲酸與乙醚混合后，在260~280nm之間有典型吸光特性，最終測得苯甲酸最低檢出量為1mg/kg，回收范圍84.4%~95.3%，從而證明紫外分光光度法穩(wěn)定性、抗干擾性及準(zhǔn)確性。

5·薄層層析法

該法原理是將試樣酸化后，用乙醚提取苯甲酸，將試樣提取液濃縮，點(diǎn)于聚酰胺薄層板上展開，顯色后，根據(jù)薄層板上苯甲酸比移值與標(biāo)準(zhǔn)比較定性，并可進(jìn)行概略定量，〔GB/T2009.29–2003〕。張秀堯〔17〕采用聚酰胺薄膜層析檢測食品中苯甲酸，經(jīng)實(shí)驗(yàn)測得苯甲酸檢出下限為1μg。

6·展望

隨著苯甲酸在食品中添加量檢測方法相繼建立，理想分析方法應(yīng)是簡單、快速、準(zhǔn)確、有效、靈敏、專一、經(jīng)濟(jì)等特點(diǎn)。薄層層析法對樣品前處理繁瑣、復(fù)雜、耗時(shí)，易受時(shí)間、雜質(zhì)等因素干擾，準(zhǔn)確性相對較低。高效液相色譜法、氣相色譜法、毛細(xì)管電泳法是近年發(fā)展起來檢測方法，此類檢測方法快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定；但所需儀器設(shè)備投資大，對操作技術(shù)要求高，尚未能得到廣泛應(yīng)用。而紫外分光光度法具有靈敏度高、分析時(shí)間短、成本低等優(yōu)點(diǎn)，適于批量檢測。隨著待測食品種類擴(kuò)大和食品基質(zhì)成分復(fù)雜化，來自食品中非測定成分干擾將日益增多。因此對檢測樣品純化、檢測手段要求將越來越高，發(fā)展廉價(jià)、靈敏、專一、快速凈化手段和檢測方法是今后研究方向。

來源：中國食品添加劑網(wǎng)

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